Moléculas shRNA invertem a ataxia de Friedreich em células

Uma monotorização de moléculas conhecidas como de curto-circuito em gancho de ARN (shRNA) revelou que certas características da ataxia de Friedreich podem ser aliviadas por duas sequências específicas de shRNA. No laboratório do Dr. Robert B. Wilson na Faculdade de Medicina da Universidade da Pennsylvania (EUA), os investigadores realizaram um estudo que expuseram células isoladas de pacientes de ataxia de Friedreich para shRNAs e resgataram a expressão de frataxina das células.

A deficiência de frataxina, a raiz da ataxia de Friedreich, é prejudicial para a função mitocondrial. A proteína é uma acompanhante dos aglomerados de ferro-enxofre que permitem aos complexos respiratórios necessários às células transformar glucose em energia durante a fosforilação oxidativa dentro das mitocôndrias. Como tal, as células dos pacientes com AF são particularmente sensíveis ao beta-hidroxibutirato (BHB) porque esta molécula interfere mais com o metabolismo da glucose.

"Aproveitámos a sensibilidade específica destas células para a média baseada no BHB para identificar shRNAs que invertam esta sensibilidade", escreveu o autor principal, Dr. M. Grazia Cotticelli, no artigo, "Rastreio fenotípico da ataxia de Friedreich usando seleção de shRNA aleatória", que foi publicado no Journal of Biomolecular Screening.

O Dr. Cotticelli, o Dr. Wilson, e o resto da equipe de investigação começou com uma biblioteca de moléculas shRNA que tinam descoberto num estudo anterior. A biblioteca contém cerca de 300.000 moléculas shRNA completamente aleatórias, permitindo uma monotorização imparcial para aquelas que podem ser eficazes. Os investigadores aplicaram estas sequências shRNA a células de fibroblastos de pacientes e analisaram as células que permaneceram vivas após a exposição ao BHB.

Duas moléculas shRNA reforçaram com sucesso o crescimento de células na média do BHB: clone gFA2 e clone gFA11. Apenas a gFA2 aumentou a expressão de proteína frataxina. As células tratadas com gFA2 viram uma duplicação do mRNA da frataxina.

"Uma das sequências de shRNA que identificámos aumenta a expressão da frataxina", escreveram os autores, "assim revertendo parcialmente o defeito primário na ataxia de Friedreich." Como a shRNA se integra no genoma de uma célula de forma permanente, o desenvolvimento de um tratamento baseado na shRNA semelhante ao gFA2 pode beneficiar os pacientes com ataxia de Friedreich tanto a curto como a longo prazo. Estratégias como estas são essenciais para ajudar os pacientes, pois não existem atualmente tratamentos adequados para a doença.

(artigo traduzido)

Fonte: http://friedreichsataxianews.com/2015/09/01/shrna-molecules-reverse-friedreichs-ataxia-cells/