O FERRO NA PATOGÉNESE DA ATAXIA DE FRIEDREICH


Texto do Resumo:

Descrição (fornecida pelo requerente): A ataxia de Friedreich (FRDA) é devido à transmissão homozigoto de expansões de guanina-adenina-adenina (GAA) repetidas de trinucleotídeos nos genes parentais de frataxina (FXN). O resultado é a deficiência de frataxina. A frataxina é uma proteína mitocondrial que sofre maturação específica durante e após a transferência para o interior mitocondrial. A sua função normal putativa é a biogénese de aglomerados de ferro-enxofre (Fe-S) transportando a homeostase de ferro para toda a célula. Um fornecimento inadequado de aglomerados de Fe-S prejudica seriamente as atividades dos complexos I, II e III da cadeia de transporte de eletrão mitocondrial e a enzima do ciclo do ácido cítrico, aconitase. Além da qualidade inferior da biossíntese dos fosfatos de alta energia, a falta de frataxina também aumenta a sensibilidade ao stress oxidativo, que presume-se que deve ser mediado por ferro livre ou frouxamente ligado. O dano tecidual na FRDA é muito diversificado. No coração, a doença causa acumulação limitada de ferro em cardiomiocites, mas semelhante excesso restrito de ferro não tem sido demonstrado em sistemas nervosos centrais ou periféricos. Ensaios de ferro total não identificaram as pequenas quantidades catalíticas do metal que são necessárias para a geração de espécies tóxicas de oxigénio. Também é improvável que tecidos humanos de autópsias sejam adequados para a determinação direta desta pequena piscina de ferro altamente reativo. Não obstante, falhando a homeostase de ferro, pode ainda ser avaliada pelos efeitos "downstream" de ferro em proteínas que respondem ao ferro, entre as quais a ferritina, a ferritina mitocondrial e a ferroportina são as mais suscetíveis de sofrer alterações. Na FRDA, os núcleos cerebelares pectínea e o gânglio da raiz dorsal (DRG) da medula espinhal são altamente vulneráveis. Esta investigação irá testar a hipótese de que o efeito adverso da deficiência de frataxina nesses sítios anatómicos é o resultado de ferro em excesso difuso ou localizado. O aumento regional pode ser determinado diretamente por uma nova tecnologia, raio-x de fluorescência de alta definição (HDXRF); e indiretamente por um exame sistemático às proteínas reativas ao ferro. O investigador irá combinar o HDXRF com técnicas slide e ensaios bioquímicos de ferritina e ferroportina. O HDXRF "mapeia" o ferro em blocos de tecido e permite a sua quantificação com base em padrões. Seções do mesmo bloco exibindo produtos de reação imunocitoquimica às proteínas reativas ao ferro e "mapas" de ferro serão combinados precisamente para chegar a uma correlação de ferro e proteínas. Os níveis de ferritina e ferroportina deverão ser inversamente correlacionados com as concentrações de frataxina. Uma correlação também pode existir com a idade do paciente no momento da morte ou a duração da sua doença. A expressão da ferritina mitocondrial, em resposta à deficiência de frataxina é mais complexa, e os resultados são esperados para ser tudo ou nada, como já relatado por corações com FRDA. A FRDA também pode causar dismetabolismo de ferro devido à maturação incorreta de frataxina intramitocondrial. Este fator de contribuição potencial será examinado pela mancha Ocidental de precursores de frataxina e a proteína funcional madura e, numa abordagem mais robusta, a tecnologia de afinidade isótopo-codificada e espectrometria de massa em tandem. Esta investigação também utiliza tecnologia slide avançada, tais como a microscopia de imunofluorescência duplo-rótulo para quantificar os danos nas células nervosas e a perda de terminais sinápticos em regiões de ferro aumentado; e microscopia eletrônica para revelar a ferritina citosólica e mitocondrial. A concentração elevada de ferro normal num determinado tecido, como o núcleo denteado, não transmite necessariamente maior vulnerabilidade à FRDA. Portanto, o globus pallidus com os seus níveis de ferritina e ferro igualmente altos serão adicionados como um controle interno. Além disso, o fenótipo neuropatológico de algumas ataxias espinocerebelosas (SCAs) inclui lesões do DRG. Amostras de SCA serão estudadas num esforço paralelo para determinar que as mudanças no DRG em pacientes com FRDA são específicas para a deficiência hereditária de frataxina. O trabalho é clinicamente relevante, porque irá resolver questões sobre ferro na patogénese formal e história natural da FRDA e o valor potencial da quelação de ferro.

Declaração de relevância para a saúde pública:

A ataxia de Friedreich (FRDA) é a ataxia hereditária mais comum, afetando 5.000-6.000 crianças e adultos jovens nos Estados Unidos em qualquer altura. A frequência dos portadores é de 1:50 a 1:100. A doença deve-se a uma mutação no gene frataxina, que controla as etapas importantes no metabolismo de ferro e energia de todas as células. O sistema nervoso central e periférico e o coração são mais vulneráveis. A mutação consiste numa expansão da repetição anormal trinucleotídeo de adenina-adenina-guanina, e as pessoas com tal expansão em ambos os alelos parentais têm falta de frataxina suficiente nas suas mitocôndrias. Esta investigação é dedicada ao estudo do metabolismo do ferro perturbado no núcleo denteado de gânglios do cerebelo e raízes dorsais da medula espinhal porque estas estruturas anatómicas são muito suscetíveis a danos na FRDA. A investigação deverá ter impacto elevado na nossa compreensão da história natural da FRDA e terapias futura. Vários ensaios clínicos com medicamentos experimentais estão, atualmente, em curso. A investigação proposta irá fornecer a base científica para a sua eficácia. O medicamento idebenona visa neutralizar o dano oxidativo mediado pelo ferro e pode ser benéfico para as doenças de coração dos pacientes com FRDA. A terapia quelante é um esforço para remover ferro de tecidos afetados e permanece controversa. A investigação proposta ajudará a esclarecer o benefício potencial da terapia de quelação na FRDA.

 

 
Fonte: http://projectreporter.nih.gov/project_info_description.cfm?aid=8655559&icde=0

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