14 de julho de 2013

Imuno-ensaio de alto rendimento para o diagnóstico bioquímico da Ataxia de Friedreich em manchas de sangue seco e sangue inteiro





Devin Oglesbee, Charles Kroll, Oleksandr Gakh, Eric c. Deutsch, David r. Lynch, Ralitza Gavrilova, Silvia Tortorelli, Kimiyo Raymond, Dimitar Gavrilov, Piero Rinaldo, Dietrich Matern e Grazia Isaya

 

Resumo

 

Fundo: A ataxia de Friedreich (FRDA) é causada por concentrações reduzidas de frataxina (FXN). Um diagnóstico clínico é tipicamente confirmado por ensaios baseados em ADN para expansões de repetições GAA ou mutações no gene FXN (frataxina); no entanto, estes ensaios não são aplicáveis ao acompanhamento terapêutico e rastreio da população. Para facilitar o diagnóstico e acompanhamento de pacientes com FRDA, desenvolvemos um imuno-ensaio para medição da FXN.

 

Métodos: Foram usados pares de anticorpos para capturar FXN e uma proteína de controlo interno, ceruloplasmina (CP), em 15 µ l de sangue total (WB) ou um soco de 3 mm de uma mancha de sangue seco (DBS). As amostras foram processadas num analisador Luminex LX200 e validadas de acordo com critérios padrão.

 

Resultados: A recuperação média de FXN das amostras de WB e DBS foi de 99%. Intra e inter valores de imprecisão (CV) foram 4,9%-13% e 9,8%-16%, respetivamente. O limite FXN de deteção foi 0,07 ng/mL, e o intervalo reportável de concentrações foi 2–200 ng/mL. Referência adultas e pediátricas de concentrações de FXN variaram de 15 a 82 ng/mL (mediana, 33 ng/mL) para DBS e WB. O intervalo de concentração FXN foi 12-22 ng/mL (mediana, 15 ng/mL) para portadores de FRDA e 1 – 26 ng/mL (mediana de 5 ng/mL) para pacientes de FRDA. A medição da relação FXN/CP aumentou a capacidade de distinguir entre pacientes, portadores e a população de referência.

 

Conclusões: Este ensaio é aplicável para o diagnóstico e acompanhamento terapêutico da FRDA. Este ensaio pode medir a FXN e a proteína de controlo CP em amostras de WB e DBS com requisitos de amostra mínima, criando o potencial para seleção de população de alto rendimento da FRDA.

 

4 de julho de 2013

Células para o resgate



01.07.13 00:44 - LOLA TORRENT |ALICANTE.


A ataxia de Friedreich é uma doença que tem a sua origem num problema genético. Geralmente ocorre na infância, quando as crianças estão entre oito e 15 anos de idade. Quando ele aparece, ele paralisa-los para sempre. A incapacidade de mover-se não é o único sintoma associado com a doença. Eles também podem sofrer de doenças cardíacas graves e de problemas ósseos, tal como a escoliose, embora ambos os problemas sejam tratáveis. O que não tem cura é a parte neurológica. Os neurónios dos pacientes vão morrendo sem qualquer escolha, até deixá-los acamados e sem qualquer controle sobre seu próprio corpo.

Uma investigação iniciada há quatro anos pelo Instituto de Neurociências (IN) da Universidade Miguel Hernández (UMH) em Elche (Espanha) poderia mudar completamente as coisas. «Não podia curar os doentes que já estão parados, mas podemos tentar que não parem, os que ainda está em movimento», explica o vice-presidente do IN e diretor de pesquisa sobre a Ataxia, Salvador Martinez.

O antídoto, de acordo com experiências realizadas em ratos, pode ser encontrado no próprio corpo do paciente. "Nós sabemos que existem células com propriedades benéficas para os neurónios. De que se trata é de usar células da medula espinhal como medicamentos”, diz Martinez. Esta forma de tratamento, chamada terapia celular, está sendo testada em pacientes que sofrem de Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA), doença neurodegenerativa de que sofre com o famoso físico Stephen Hawking. O centro de referência, onde estão sendo realizados os ensaios clínicos é mo Hospital Virgen de Arrixaca em Murcia (Espanha) e todas as pesquisas básicas antes das experiências em humanos foram realizadas no Instituto de Neurociência de Alicante (Espanha).

Como resultado do conhecimento adquirido nesta linha de investigação, a equipe de Salvador Martinez mudou-se para modelos experimentais da Ataxia de Friedreich com um prognóstico tão bom na ELA. No caso da Ataxia, a doença é caracterizada pela morte dos neurónios do gânglio dorsal da coluna vertebral. O tratamento sugerido consiste num transplante de células da própria medula do paciente para a área da coluna vertebral. Os resultados obtidos em ratos são, no mínimo, promissores. «Não só funciona, como sabemos perfeitamente porque o faz: as células preenchem os gânglios dorsais e sua presença impede que os neurónios possam morrer», explica.

A boa resposta dos ensaios laboratoriais chamou a atenção da prestigiada Fundação americana FARA (Friedreich Ataxia Research Alliance – Aliança de Investigação para a Ataxia de Friedreich). Esta organização concentra seus esforços em apoiar financeiramente a investigação neste tipo de patologias, internacionalmente. Na verdade, atualmente é destinar fundos para três equipas de pesquisa no mundo: o Instituto de Neurociências de Alicante, um laboratório australiano e outro baseado em Londres. Todos eles trabalham desde o ano passado, 2012, em coordenação na mesma linha de experiências através da troca contínua de informações, materiais e pessoal.

Experiências em seres humanos

O IN está atualmente no processo de elaboração do ensaio clínico que é obrigatório para a Agência Espanhola de Medicamentos - dependente do Ministério da Saúde - pode estudar e autorizar a aplicação em seres humanos desta terapia experimental. Novamente, o Hospital Virgen de Arrixaca em Murcia seria o lugar onde o ensaio clínico realizado. Salvador Martinez está confiante de que ele pode dar este passo em um período não superior a um ano.

"Nalgum momento temos que saltar de ratos para seres humanos. Neste sentido, aqueles que têm formação médica têm uma maior capacidade para assumir determinados riscos. O médico sente a pressão dos pacientes e está empenhado em tentar curar. Não assumimos mais riscos do que o necessário, mas deve ser feito," reflete o vice-presidente do IN e Professor de Anatomia da UMH.

Três fases

As experiências em seres humanos, explica Salvador Martinez, consistem em três fases. A primeira é exclusivamente para verificar que o tratamento não causar danos ao paciente. As doses aplicadas são muito pequenas e só depois de verificada a sua segurança, multiplicam-se, a fim de explorar se o paciente tem qualquer melhoria. Nesta segunda fase é o ensaio clínico com pacientes com Esclerose Lateral Amiotrófica que começou a ser pioneira no Hospital Virgen de Arrixaca, em Múrcia. Quando verificar-se que o tratamento é seguro e benéfico, é alcançada a terceira e última fase, que consiste em generalizar o seu aplicativo além do complexo do hospital, onde foi realizado o ensaio clínico. A partir desse momento, a experiência deixa de o ser e passa a ser uma terapia.

«Quando os pacientes de Ataxia me perguntam se podem ter esperança, eu respondi que eu tenho. Sem ela, eu não poderia trabalhar. Tento não dar falsas esperanças, mas quando vemos as coisas através de todos os filtros, devemos crer," conclui.


Fonte:
http://www.laverdad.es/alicante/v/20130701/cultura/celulas-rescate-20130701.html

3 de julho de 2013

O projeto RARE-BestPractices visa melhorar e harmonizar o controlo clínico das doenças raras

 

RARE-Bestpractices meeting
 
The research has received funding from the European Union Seventh Framework Programme (FP7/2007-2013) under grant agreement n° 305690
 
O RARE-Bestpractices, um projeto de quatro anos financiado ao abrigo do 7.º Programa-Quadro da União Europeia, reúne uma equipa de peritos de alto nível nas áreas das orientações em matérias de prática clínica, recensão sistemática, avaliação das tecnologias de saúde, políticas de saúde, epidemiologia das doenças raras e saúde pública com o objetivo de desenvolver uma plataforma sustentável para a criação de redes que permitas a partilha de boas práticas no controlo das doenças raras.
As tarefas principais do projeto incluem a recolha, a avaliação e a divulgação das orientações existentes em termos de boas práticas nas doenças raras; a identificação de uma metodologia consensual para desenvolver e atualizar as orientações: atividades de formação vocacionadas para a divulgação de conhecimentos mais e menos especializados; e um fórum para a troca de informações e a facilitação de colaborações.
A EURORDIS atuará como parceiro transversal do projeto RARE-Bestpractices, assegurando o envolvimento e a capacitação das associações de doentes europeias, estando previsto o seu envolvimento específico na coordenação científica e no estabelecimento de redes, contribuindo para a gestão das atividades de formação. Além disso, a EURORDIS, para garantir o envolvimento dos doentes e das respetivas famílias no processo de elaboração, contribuirá para a criação de uma versão para doentes do modelo-piloto de orientações para boas práticas que resume as recomendações destinadas aos profissionais de saúde. A EURORDIS trabalhará ainda sobre a capacitação com as associações de doentes, salientando os benefícios das orientações de boas práticas através da divulgação de informações e da educação dos representantes dos doentes.
 
Coordenado pelo Centro Nacional para as Doenças Raras do Istituto Superiore di Sanità (Roma), a Rare-BestPractices arrancou inicialmente em fevereiro de 2013 com uma oficina sobre normas comuns de qualidade metodológica para identificação e desenvolvimento de orientações de boas práticas em doenças raras.  No final de maio de 2013, decorreu uma segunda reunião onde os participantes debateram os primeiros resultados, as atividades futuras e o plano de trabalho. Ao melhorar e harmonizar o controlo clínico das doenças raras, o RARE-Bestpractices melhorará os resultados e a qualidade de vida dos doentes em termos de saúde, reduzindo a desigualdade nos cuidados das doenças raras.

Tradutores: Ana Cláudia Jorge e Victor Ferreira
 
FONTE:

2 de julho de 2013

Espectro clínico da ataxia cerebelar de início precoce com reflexos mantidos: uma ataxia autossômica recessiva para não ser esquecida

Arquivos de Neuro-Psiquiatria

Resumo

PEDROSO, Jose Luiz et al. Espectro clínico da ataxia cerebelar de início precoce com reflexos mantidos: uma ataxia autossômica recessiva para não ser esquecida. Arq. Neuro-Psiquiatr. [online]. 2013, vol.71, n.6, pp. 345-348. ISSN 0004-282X.  http://dx.doi.org/10.1590/0004-282X20130036.
As ataxias cerebelares autossômicas recessivas são um grupo heterogêneo de doenças neurológicas. Em 1981, foi descrita uma entidade neurológica incluindo ataxia cerebelar progressiva de início precoce, disartria, liberação piramidal e manutenção ou aumento dos reflexos tendíneos nos membros superiores e inferiores. Essa síndrome é conhecida como ataxia cerebelar de início precoce com reflexos mantidos. Neste artigo, o objetivo foi chamar a atenção para o diagnóstico de ataxia cerebelar de início precoce com reflexos mantidos como a segunda causa mais comum de ataxia cerebelar autossômica recessiva, após a ataxia de Friedreich, e também realizar um estudo do espectro clínico da síndrome. Doze pacientes de diferentes famílias preencheram os critérios clínicos para ataxia cerebelar de início precoce com reflexos mantidos. Disartria e atrofia cerebelar foram as características mais frequentes. No entanto, não há consenso se a ataxia cerebelar de início precoce com reflexos mantidos é uma doença homogênea ou um grupo de síndromes com fenótipos semelhantes representadas por diferentes entidades genéticas. Estudos moleculares futuros são necessários para fornecer respostas definitivas para as questões pendentes em relação à ataxia cerebelar de início precoce com reflexos mantidos.
 
Fonte:

1 de julho de 2013

Um novo projeto: NEUROMICS

A NEUROMICS é um projeto de pesquisa financiado pela União Europeia FP7. A NEUROMICS pretende revolucionar diagnósticos e desenvolver novos tratamentos para dez doenças raras neuromusculares e neurodegenerativas. O consórcio do projeto é coordenado pelo Professor Olaf Riess na Universidade de Tuebingen, na Alemanha, e ele é apoiado pelos coordenadores, Professora Brunhilde Wirth (Colónia, Alemanha) e Professor Gert-Jan van Ommen (Leiden, Holanda). O coordenador da doença ataxia é o Professor Thomas Klockgether em Bona, Alemanha.

O site deste projeto já está disponível em http://www.rd-neuromics.eu (apenas na língua inglesa) e deve providenciar uma explicação bastante detalhada de quem está envolvido e os principais objetivos da investigação.

Também podem encontrar a newsletter do projeto, em formato PDF, em: http://www.rd-neuromics.eu/news-events/neuromics-newsletter/. (também em inglês).

Revisão sobre as técnicas de diagnósticos moleculares na Ataxia de Friedreich

Pravin D. Potdar e Aarthy Raghu

Departamento de Medicina Molecular e Biologia, Hospital Jaslok e Centro de Pesquisa, 15 Dr. G. Deshmukh Marg, Mumbai 400026, Maharashtra, Índia.

Resumos

A ataxia de Friedreich é uma doença neurodegenerativa hereditária comumente com um padrão autossómico recessivo de herança e foi descrita por Nikolaus Friedreich primeiro em 1863. A ataxia de Friedreich é causada devido à hiperexpansão de repetições do trinucleotídeo GAA intrónico ou mutações no gene FXN no cromossoma 9q13. Este gene codifica uma proteína mitocondrial, a frataxina, que é altamente conservada em muitas espécies e tem funções na biossíntese de ferro-enxofre. A ataxia de Friedreich principalmente resulta de uma deficiência da proteína frataxina, devido a mutações no gene FXN. A formação de ADN pegajoso, a formação do ADN-ARN e alterações epigenéticas, incluindo a metilação do ADN e modificações histonas, são os mecanismos propostos para a interrupção da expressão do gene FXN. A maioria dos casos de ataxia de Friedreich são homozigotos e causados devido à expansão da repetição do trinucleotídeo GAA no primeiro intron do gene FXN, no entanto, alguns casos podem ser heterozigotos, com expansão GAA em um alelo e ponto de mutação ou deleção no gene FXN noutro alelo. Portanto, o diagnóstico da doença com base em apenas os sintomas clínicos torna-se difícil. O diagnóstico molecular é, portanto, importante, a fim de detetar as repetições da expansão GAA, assim como mutações no gene FXN. Esta revisão representa uma visão geral dos estudos de diagnósticos moleculares na ataxia de Friedreich, incluindo uma visão geral da doença, bem como o gene e proteína envolvida na doença e técnicas que podem ser úteis no diagnóstico da ataxia de Friedreich a. Os métodos descritos incluem ferramentas com base em análise de ADN, bem como a análise dos níveis de mARN e proteína. .


Fonte: http://www.sciencedomain.org/abstract.php?iid=239&id=9&aid=1587#.UdFEMTvrxhQ





Divulgação APAHE