18 de agosto de 2016

Neurónios derivados de células estaminais pluripotentes induzidas (iPSC) para o estudo da ataxia espinocerebelosa tipo 3


Susanne K. Hansena, Tina C. Stummann, Helena Borland, Lis F. HasholtZeynep TümerJørgen E. NielsenMikkel A. RasmussenTroels T. Nielsen, Justus C.A. Daechsel, Karina FogPoul Hyttel 


Destaques 
  • Geração de neurónios derivados de iPSC de pacientes com ataxia espinocerebelosa tipo 3 
  • Sincronizadas oscilações espontâneas de cálcio, ocorridas em 28 dias de maturação 
  • Os agregados de ataxia-3, induzidos pelo glutamato insolúvel em SDS, não podem detetar 

Resumo 
A doença neurodegenerativa ataxia espinocerebelosatipo 3 (SCA3) é causada por uma expansão da repetição CAG no gene ATXN3. Neste estudo, foram estabelecidas linhas de células estaminais pluripotentes induzidas (IPSC) de dois pacientes com SCA3. Os fibroblastos dérmicos foram reprogramados utilizando um método de integração livre e as iPSCs de SCA3 resultantes foram diferenciadas em neurónios. Estas linhas neuronais abrigavam a doença provocando mutações, expressando níveis comparáveis ​​de vários marcadores neuronais e respondendo a neurotransmissores, glutamato/glicina, GABA e acetilcolina. Além disso, todas as culturas neuronais formaram redes exibindo oscilações de cálcio espontâneas sincronizadas no prazo de 28 dias de maturação, e expressaram os marcadores neuronais maduros NeuN e sinapsina 1, implicando um estado relativamente avançado de maturidade, embora não seja comparável à do cérebro humano adulto. Curiosamente, não fomos capazes de recapitular a agregação da ataxina-3 induzida pelo glutamato, demonstrada numa publicação prévia dum modelo de iPSC derivadas da SCA3. Em conclusão, gerámos um painel de iPSCs de pacientes com SCA3 um protocolo robusto para derivar neurónios de maturidade relativamente avançada, o que poderia potencialmente ser valioso para o estudo dos mecanismos da doença SCA3. 


(artigo traduzido)